動(dòng)物生產(chǎn)學(xué)實(shí)習(xí)報(bào)告
動(dòng)物生產(chǎn)學(xué)實(shí)習(xí)報(bào)告
實(shí)習(xí)時(shí)間:201*年11月9日星期一
實(shí)習(xí)地點(diǎn):浙江省臨安市板橋鄉(xiāng)正興牧業(yè)有限公司正興牧業(yè)有限公司簡(jiǎn)介:
杭州正興牧業(yè)有限公司是在浙江省臨安市板橋鄉(xiāng)畜牧獸醫(yī)站基礎(chǔ)上新建的股份制省級(jí)農(nóng)業(yè)科技企業(yè)、是浙江省畜禽種苗核心工程“波爾山羊繁育基地”和省一級(jí)種羊場(chǎng)。享有“浙江省先進(jìn)農(nóng)業(yè)龍頭企業(yè)”、“省級(jí)現(xiàn)代農(nóng)業(yè)示范園區(qū)”等榮譽(yù)。公司位于風(fēng)景秀麗的國(guó)家級(jí)森林公園青山湖畔,杭州至黃山的高速公路旁,交通便利。
公司是浙江省先進(jìn)農(nóng)業(yè)龍頭企業(yè),國(guó)家星火計(jì)劃“臨安市板橋生態(tài)牧業(yè)科技示范園區(qū)”項(xiàng)目承擔(dān)者。公司占地170畝,公司現(xiàn)有職工110人,擁有現(xiàn)代化奶牛場(chǎng),存欄奶牛800頭,瘦肉型豬場(chǎng)規(guī)模10000頭,波爾山羊種羊場(chǎng)種羊157頭。辦有飼料廠、乳品廠、肉類屠宰廠和畜牧獸醫(yī)技術(shù)服務(wù)中心。1999年總產(chǎn)值2400萬(wàn)元,利潤(rùn)85萬(wàn)元。201*年總資產(chǎn)4050萬(wàn)元,產(chǎn)值5150萬(wàn)元。主導(dǎo)產(chǎn)品為鮮牛乳及鮮乳制品、鮮豬肉、肉雞及雞蛋。
下屬的浙江臨安波爾山羊繁育推廣中心始建于1999年8月,通過(guò)三年來(lái)的發(fā)展,現(xiàn)已成為浙江省定點(diǎn)的省一級(jí)波爾山羊種羊場(chǎng)和省級(jí)"先進(jìn)農(nóng)業(yè)龍頭企業(yè)"。
"中心"位于杭州西部的臨安市青山湖國(guó)家森林園風(fēng)景區(qū)內(nèi),距離杭州42公里,傍倚省通道線一級(jí)公路,交通便捷,F(xiàn)存欄來(lái)自南非、新西蘭和澳大利亞不同血統(tǒng)的波爾山羊157頭,薩能、關(guān)山奶山羊等良種基礎(chǔ)母羊700余頭,下設(shè)板橋亭子,市畜種站、石瑞蒲村二個(gè)波爾山羊育種基地,和一個(gè)肉用山羊新品種選育基地。同時(shí),配合市政府在全市重點(diǎn)養(yǎng)羊鄉(xiāng)鎮(zhèn)建立了60個(gè)波爾山羊雜交改良服務(wù)點(diǎn)和200個(gè)肉羊飼養(yǎng)基地。三年來(lái),累計(jì)向省內(nèi)外推廣波爾山羊73頭,雜交羊5200余頭,改良當(dāng)?shù)啬秆?萬(wàn)余胎次,為全省山羊改良和農(nóng)民增收起到了積極的推動(dòng)作用。
"中心"建立以來(lái),不斷投入,走科技創(chuàng)新之路,先后承擔(dān)了省市各級(jí)人工授精、細(xì)管冷凍精液、胚胎移植、雜交改良等科研攻關(guān),農(nóng)業(yè)豐收科技項(xiàng)目7個(gè),建立了波爾山羊良種快速擴(kuò)繁選育和飼養(yǎng)技術(shù)體系。同時(shí),率先引進(jìn)應(yīng)用BLUP計(jì)算機(jī)種羊生產(chǎn)育種和管理,以企業(yè)標(biāo)準(zhǔn)組織生產(chǎn)經(jīng)營(yíng)。
展望未來(lái),我們將加大科技和資金投入力度,通過(guò)不斷從國(guó)內(nèi)外引進(jìn)優(yōu)良波爾山羊種羊或胚胎,實(shí)施胚胎移植技術(shù)來(lái)加快波爾山羊的繁殖速度,爭(zhēng)取通過(guò)五年的努力,成為年提供波爾山羊種羊5000頭,出欄肉羊20萬(wàn)頭,產(chǎn)值超億元的產(chǎn)業(yè)化龍頭,成為全國(guó)重點(diǎn)的波爾山羊繁育改良和肉羊加工基地。
我們?cè)概c社會(huì)各界加強(qiáng)合作,共謀發(fā)展,為單位或個(gè)人提供優(yōu)質(zhì)的種質(zhì)資源,先進(jìn)的種羊選育和肉羊集約。公司積極推行現(xiàn)代企業(yè)經(jīng)營(yíng)理念和管理制度,以“專業(yè)、專注、精品、高效”為企業(yè)經(jīng)營(yíng)方針,為發(fā)展種羊事業(yè)不遺余力。實(shí)習(xí)目的:了解奶牛各各生長(zhǎng)階段需要注意的事項(xiàng)。實(shí)習(xí)過(guò)程:
11月9日早上八點(diǎn)半,生物技術(shù)061班和062班同學(xué)出發(fā)去安市板橋鄉(xiāng)正興牧業(yè)有限公司的一個(gè)奶牛場(chǎng)實(shí)習(xí)。在車上同學(xué)們都懷著喜悅的心情。9點(diǎn)半左右我們乘車到了安市板橋鄉(xiāng)正興牧業(yè)有限公司奶牛場(chǎng)。一下車就有一股撲鼻的臭味傳來(lái)就讓人想吐。而后我們到了更衣室換上了奶牛場(chǎng)工作用的服裝,通過(guò)消毒池就進(jìn)入了奶牛場(chǎng)。我們先是到了奶牛牛欄里觀看奶牛?吹搅撕枚囝^黑白花奶牛,且有很多奶牛后腿都得病了。牛欄內(nèi)臭味翻天,說(shuō)明該奶牛場(chǎng)管理不好。老師告訴我們?nèi)绾螐挠N卡片上辨別牛的年齡和其身份。
在去飼料儲(chǔ)存室的路上看到了一地的紅胡蘿卜,在紅胡蘿卜上有著許許多多的蒼蠅。這就不難知道奶牛為什么生病了。在飼料存儲(chǔ)室我們看到了精料、青貯飼料、粗飼料、青飼料。
精料的組成:能量飼料+蛋白質(zhì)飼料+礦物質(zhì)飼料+維生素飼料+添加劑+載體或稀釋劑,用量占全飼糧干物質(zhì)的15%~40%。一進(jìn)青貯飼料儲(chǔ)存室就有一股芳香水果、酒酸味,給人以舒適感覺(jué)。說(shuō)明其在青貯飼料料調(diào)制上掌握的非常好。我用耙扒了一下發(fā)現(xiàn)其壓。在課堂上老師講解青貯飼料調(diào)制的步驟是:(1)青貯設(shè)備的準(zhǔn)備。舊窖(壕、塔)在使用前要清理出雜物,修補(bǔ)并消毒。也可在使用前一周選擇地下水位低、干燥、土質(zhì)堅(jiān)硬的地方挖建青貯窖。窖壁要光滑而略傾斜,窖口要略大于底部。實(shí)訓(xùn)用青貯設(shè)備可用水缸或塑料袋。(2)青貯原料的收割和切短。選擇晴好的天氣,待到原料植株達(dá)到收割適期時(shí)(玉米可在乳熟至蠟熟期、禾本科牧草可在孕穗至抽穗期,豆科牧草在現(xiàn)蕾至開(kāi)花初期、薯秧類要收薯或霜前1-2d)收割。原料收割后立即運(yùn)到青貯地點(diǎn)切短,原料不多時(shí)用鍘刀鍘短,否則用切碎機(jī)切短。作喂豬用的青貯原料刀短成2-3cm或更短;喂牛、羊用的則切成3-5cm,粗莖原料或粗硬的細(xì)莖原料切成2-3cm;葉菜類和幼嫩原料可不切。如有多種原料時(shí),在切碎的同時(shí)要按比例將各種原料混勻(有條件時(shí)可進(jìn)行不同原料和使用不同添加物的對(duì)比青貯試驗(yàn))。(3)裝填和壓實(shí)。裝窖前先在窖底鋪一層15-20cm厚的麥草或其他秸稈,窖壁四周可鋪一層塑料薄膜,加強(qiáng)密封,防止透水漏氣。菜葉類、水生飼料等含水量大的原料,在裝填時(shí)要摻入適量的糠麩以調(diào)節(jié)含水量。裝填青貯原料時(shí),應(yīng)逐層裝入,每層裝15-20cm,隨裝隨壓實(shí)。添加糠麩、谷實(shí)等進(jìn)行混合青貯時(shí),要在壓緊前分層混合。壓實(shí)的方法:小型窖可用人力踩踏,大型長(zhǎng)壕可用鏈軌拖拉機(jī)等,要特別注意壓緊窖的邊緣用四角。這樣層層裝填、壓實(shí),直至高出窖口50-60cm為止。(4)密封和管理。裝滿原料后即可加蓋封頂。先覆蓋一層塑料薄膜,再蓋一層切短的秸稈或軟草,厚20-30cm;然后蓋上潔凈的濕土,厚約30-50cm,并做成饅頭形(圓窖)或屋脊形(長(zhǎng)窖),蓋土的邊緣要超出窖口四周外圍,以利排水。用塑料袋做青貯時(shí),裝滿原料后用細(xì)繩扎緊袋口即可。封窖后在距窖四周約lm處庳挖排水溝,以防雨水流入窖內(nèi)。貯后1周內(nèi),隨時(shí)檢查、修整封土裂縫、下陷等,避免雨水流入和漏氣。貯后約1月即可開(kāi)窖取喂。
在后來(lái)我們到小牛飼養(yǎng)欄觀看其飼養(yǎng)環(huán)境跟泌乳奶牛一樣的差。進(jìn)行拍照紀(jì)念后買了的牛奶就回來(lái)了。實(shí)習(xí)心得:
牛場(chǎng)實(shí)習(xí)時(shí)間雖然很短,但我在實(shí)習(xí)中學(xué)到了很多在課堂上根本就學(xué)不到的知識(shí),受益非淺。實(shí)習(xí)是我們把學(xué)到的理論知識(shí)應(yīng)用在實(shí)踐中的第一次嘗試,也是每個(gè)大學(xué)生必須擁有的一段經(jīng)歷,它使我們?cè)趯?shí)踐中了解到社會(huì),讓我們學(xué)到很多課堂上根本就學(xué)不到的知識(shí),也打開(kāi)了視野長(zhǎng)了知識(shí)。為我們以后進(jìn)步走向社會(huì)達(dá)下堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。
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動(dòng)物繁殖學(xué)生產(chǎn)實(shí)習(xí)綜述
姓名:xxx學(xué)號(hào):xxxxxx
(所在院系:xxxx指導(dǎo)老師:xxxxxxx)
摘要:通過(guò)對(duì)繁殖技術(shù)的觀看、理化因素對(duì)精子的影響、豬的采精、冷凍精液的制作、兔子采精、PMSG和FSH生物測(cè)定法的實(shí)習(xí)操作,把理論與生產(chǎn)實(shí)踐相聯(lián)系、把學(xué)與習(xí)相結(jié)合,掌握了影響精子活率的理化因素、采精的技術(shù)、對(duì)精子的品質(zhì)檢測(cè)、精液的冷凍及超數(shù)排卵和同期發(fā)情技術(shù),獲益匪淺。
關(guān)鍵詞:采精;冷凍精液;超數(shù)排卵;繁殖技術(shù);正文:
一、理化因素對(duì)精子的影響(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
熟練掌握精液品質(zhì)檢查的方法,觀察理化因素對(duì)精子運(yùn)動(dòng)及生存性能的影響。(二)實(shí)驗(yàn)材料
1、新鮮豬精液
2、藥械用品:顯微鏡、載玻片、蓋玻片、溫度計(jì)、滴管、紗布、蒸餾水、3%和1%氯化鈉溶液、2%煤酚溶液、75%酒精等。(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、溫度的影響
將新鮮原精液1滴滴在載玻片上,置于顯微鏡下觀察其精子活率,再放在45-50℃溫度下2min,觀察精子活率有何變化。
2、滲透壓的影響
將新鮮原精液作出精子活率評(píng)級(jí)后,分別在2滴原精液內(nèi)分別加入3%氯化鈉和蒸餾水1滴混合均勻后觀察精子活率及精子形態(tài)有何變化。
3、化學(xué)消毒藥物的影響
取1滴原精液置于載玻片上,評(píng)定其精子活率后,再用滴管往精液上滴1滴70%酒精,觀察精子活率及形態(tài)有何變化。(四)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
1、正常精子的活率評(píng)為0.9,在45℃處理后,發(fā)現(xiàn)精子的運(yùn)動(dòng)速度明顯減慢,且有很
多精子停止運(yùn)動(dòng),活率評(píng)為0.3。這是由于精子的耐高溫很差,在45℃時(shí),很多精子中的失去活性,導(dǎo)致精子死亡。
2、新鮮原精液加入3%氯化鈉和蒸餾水后,精子全部死亡。這是由于新鮮原精液的精子處在等滲狀態(tài),活率最高,加入3%氯化鈉,形成高滲環(huán)境,精子失水死亡。加入蒸餾水形成低滲環(huán)境,精子吸水漲破。
3、原精液滴1滴70%酒精后,會(huì)觀察到精子一點(diǎn)點(diǎn)在喪失活力,在一側(cè)滴上酒精后,會(huì)發(fā)現(xiàn)精子在向另一側(cè)沒(méi)有酒精的一側(cè)移動(dòng),到最后精子幾乎全部都死亡。這是因?yàn)橄舅幬锶缇凭蛎悍訉?duì)精子有毒害作用。二、觀看繁殖技術(shù)錄像片(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
了解豬、牛、羊等家畜的生殖生理,掌握人工受精的相關(guān)繁殖技術(shù)。(二)實(shí)驗(yàn)材料
關(guān)于家畜繁殖的有關(guān)的VCD(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容主要觀看牛豬的生殖生理與人工受精操作錄像(四)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
通過(guò)觀看有關(guān)家畜主要是牛豬的繁殖的VCD,了解到了很多關(guān)于牛羊豬的生殖生理與人工受精操作的基本知識(shí)。對(duì)要進(jìn)行的關(guān)于兔子的采精和豬的采精有了初步的了解,為接下來(lái)的實(shí)習(xí)奠定了基礎(chǔ)。三、激素對(duì)母兔卵巢的作用(一)實(shí)習(xí)目的
通過(guò)實(shí)驗(yàn)了解促卵泡素,孕馬血清促性腺激素,人絨毛膜促性腺激素的作用。了解卵子的正常和異常形態(tài)結(jié)構(gòu),認(rèn)識(shí)受精卵和未受精卵之區(qū)別,初步掌握沖卵和檢卵技術(shù),為掌握胚胎移植技術(shù)奠定基礎(chǔ)。(二)材料和器械
1、動(dòng)物:挑選健康,成年未孕的母兔
2、器具:玻璃注射器,兔用手術(shù)臺(tái),創(chuàng)巾,止血紗布,藥棉,縫合針和線,移卵管,實(shí)體顯微鏡
3、藥品:FSH,PMSG,HCG,75%酒精,0.9%NaCl,碘酒,新潔爾滅液,沖卵液,麻醉藥
(三)內(nèi)容和步驟
1、兔超數(shù)排卵處理
(1)FSH處理組先用酒精棉球消毒母兔股內(nèi)側(cè),每只每次肌肉注射FSH60-80IU,連續(xù)注射6次,每次相隔10~14h,最后一次注射FSH后,從耳靜脈注射(先用酒精棉球消毒耳朵邊緣)HCG65-75IU,隨即放入公兔籠內(nèi),觀察是否配種。一般來(lái)說(shuō),超排處理后,母兔陰部表現(xiàn)出發(fā)情癥狀,能成功地配種。
(2)PMSG處理組母兔股內(nèi)側(cè)消毒同上。一次注射PMSG100-1200IU。之后72h,同上述方法注射同量的HCG,隨即放入公兔籠內(nèi)。(3)對(duì)照組每天注射10ml蒸餾水。(四)手術(shù)沖胚方法
1.耳靜脈注射10ml空氣處死供體母兔。如做活體手術(shù),則用麻醉藥麻醉后再按外科手術(shù)要求打開(kāi)腹腔。
2.將把母兔背朝下放固定于兔手術(shù)臺(tái)上。3.在母兔腹部最后兩對(duì)乳頭的腹中線部剪毛用沾滿肥皂水的紗布清洗局部,再用須刀刮毛,先后分別用碘酒和酒精棉球由內(nèi)向外進(jìn)行消毒,然后蓋上創(chuàng)巾并固定好。
4.用手術(shù)刀在腹中線處皮膚切開(kāi)2~3cm長(zhǎng)的術(shù)口,再在腹壁肌白線上切一小口,用中指墊著以手術(shù)剪擴(kuò)大術(shù)口;铙w沖卵時(shí),要注意止血。
5.打開(kāi)腹腔后,沿著子宮輕輕引出輸卵管及卵巢。與卵巢下脂肪組織處,以長(zhǎng)夾夾注以固定卵巢。仔細(xì)觀察卵巢的變化,記錄排卵點(diǎn)(卵巢排完卵后的小紅點(diǎn))。
6.先在卵巢附近找到輸卵管的傘,從傘部插入沖卵管并用手指或夾子固定,另一端接表面皿。另一個(gè)人用10ml注射器配制6號(hào)針頭吸一管沖卵液(可用生理鹽水代替)。從子宮向輸卵管方向,與子宮角末端和輸卵管交界的無(wú)血管處插入針頭,使針頭伸入輸卵管內(nèi)并用手指固定。然后慢慢地推動(dòng)注射器,將沖卵液注入輸卵管,使沖卵液由傘部收集到表面皿內(nèi)。一般每次5ml即可。注意沖卵液不得流失。(五)早期胚胎觀察
將接有沖卵液的表面皿置于體視顯微鏡下,檢查胚胎的數(shù)量和發(fā)育形態(tài)。正常兔的受精卵是卵圓形,直徑為140μm,在透明帶外圍有一厚層黏蛋白層(兔胚胎特有結(jié)構(gòu))。卵黃顆粒很細(xì),分布很均勻,容易看到核的變化。在卵黃周隙內(nèi)可見(jiàn)2個(gè)極體。而未受精的卵母細(xì)胞中,粗細(xì)不一的卵黃顆粒清楚可見(jiàn),且分布不均,不能看到細(xì)胞核,在卵黃周隙內(nèi)只有一個(gè)極體。一般在交配后24h,受精卵已發(fā)育成2-細(xì)胞胚胎,48h即發(fā)育成16-細(xì)胞胚胎(早期桑葚胚)。(六)胚胎移植
1.受體的選擇選擇與共同發(fā)情時(shí)間一致(發(fā)情時(shí)間相差不易超過(guò)一天)的受體(自然發(fā)情或超排處理誘發(fā)發(fā)情)。
2.保定、麻醉、開(kāi)腹手術(shù)參照供體處理方法。3.胚胎分裝先向輸卵管內(nèi)吸進(jìn)少量PBS,接著吸入一點(diǎn)空氣,然后再將胚胎連同少量PBS吸入,接著再吸入一點(diǎn)空氣和PBS,在移卵管尖端保留一段空隙,這樣就可防止胚胎丟失。4.移植部位將胚胎移入排卵側(cè)的生殖道內(nèi)。凡從供體輸卵管內(nèi)得到的胚胎應(yīng)移植到受體輸卵管內(nèi)。從輸卵管的傘部插入移卵管2~3cm深,輕輕地注入胚胎,最后慢慢地抽出移卵管。一般一側(cè)輸卵管可移植5~10枚胚胎。如從供體子宮收集的胚胎也應(yīng)移植到受體母兔相應(yīng)得部位。
5.縫合按外科手術(shù)要求分別縫合肌層和皮膚,并進(jìn)行消毒。注意手術(shù)后供體和受體的護(hù)理。
四、豬的采精
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模赫莆肇i的采精操作方法和操作要點(diǎn)以及在采精過(guò)程中的注意事項(xiàng)。(二)實(shí)驗(yàn)材料:種公豬、棉花、紗布、溫度計(jì)、漏斗、大搪瓷盤(pán)、熱水、2%煤酚皂液、凡士林、酒精棉球、鑷子。(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、種公豬的調(diào)教2、采精前的準(zhǔn)備
量筒、三角瓶用洗滌劑洗過(guò)、沖凈,空水后放入消毒柜中,用100-125℃溫度消毒1小時(shí)。精液分裝管,用過(guò)立即用蒸餾水沖洗,并用75%酒精沖洗,可與輸精器一起放入消毒柜中,在100℃溫度下消毒1小時(shí)。大燒杯、集精杯用自來(lái)水、洗滌劑洗凈,沖洗后晾干,用前與精液分裝管一起放入消毒柜中,溫度調(diào)至38℃,預(yù)熱5分鐘。清洗雙手,用電吹風(fēng)或恒溫箱加熱集精杯,防止集精杯過(guò)冷。集精杯的準(zhǔn)備,將集精杯加溫。在集精杯中放入兩層食品袋口翻向保溫杯外,用干凈玻璃棒使食品袋與集精杯內(nèi)壁貼服將一張專用濾網(wǎng)放在保溫杯上用一根橡皮筋將濾網(wǎng)固定,并使網(wǎng)面下陷。
3、采精過(guò)程
清除公豬肋部和腹部的臟物,用右手按摩公豬包皮盡可能多的排放包皮腔中的尿液,并用紙巾拭干,誘導(dǎo)公豬爬跨假母豬,公豬陰莖勃起后,右手呈空拳,拳心向上,使陰莖進(jìn)入空拳中,并立即鎖定陰莖的龜頭,順其向前沖力,將陰莖盡可能的拉出。左手打開(kāi)集精杯蓋,公豬開(kāi)始射精后不要立即收集,待公豬射出部分精亮的液體后,開(kāi)始收集含精多的部分,當(dāng)公豬開(kāi)始環(huán)顧四周時(shí),說(shuō)明公豬射精即將結(jié)束。注意不要過(guò)早終止射精,以免影響公豬的健康。第一次射精結(jié)束后可通過(guò)適當(dāng)刺激是公豬進(jìn)行第二次射精。
4、注意事項(xiàng)
(1)最好每3天采一次精。
(2)采精時(shí)間要固定,以形成良好的條件反射,最好在每天的9點(diǎn)到10點(diǎn)左右。(3)不要收集最初射出的精液,不要過(guò)早終止采精,以防公豬不適。(4)避免精液溫度變化過(guò)快,防止陽(yáng)光照射或紫外線照射。
(5)采精的整個(gè)過(guò)程,應(yīng)小心仔細(xì),不要粗暴,以免引起公豬的反感,而影響采精。(四)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
本次實(shí)習(xí),主要是觀察老師如何現(xiàn)場(chǎng)操作,由于同學(xué)太多,剛開(kāi)始公豬有點(diǎn)緊張,F(xiàn)場(chǎng)觀察,身臨其境,對(duì)與豬的采精的手法加深了解,同時(shí)也掌握了在公豬爬跨母臺(tái)豬的過(guò)程,如何誘導(dǎo)公豬爬跨,最終成功采集精液。五、冷凍精液的制作
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模壕豪鋬鍪且环N重要的繁殖技術(shù)。通過(guò)本次試驗(yàn),要求能基本掌握冷凍精液的制作技術(shù)。(二)實(shí)驗(yàn)材料
1、新鮮豬精液
2、葡萄糖、檸檬酸鈉、甘油、雞蛋、青霉素、鏈霉素等。
3、100ml量杯、20ml量筒、50-100ml燒杯、滴管、注射器、小試管、保溫瓶、水浴鍋、液氮罐、液氮.(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
1、配制稀釋液和解凍液:
稀釋液:8%葡萄糖50ml過(guò)濾→水浴消毒10分鐘→冷卻→去38.5ml→加卵黃10ml→加甘油1.5ml→加雙抗50000單位
解凍液:5%葡萄糖50ml過(guò)濾→水浴消毒10分鐘→冷卻→去38.5ml→加卵黃10ml→加甘油1.5ml→加雙抗50000單位
2、稀釋與平衡:
取新鮮豬精液,用等溫的稀釋液以1:1稀釋后,(分別取2ml)用紗布和棉花包裹,放在8℃條件下3.5-6h。
3、冷凍:
用金屬容器盛滿液氮,用塑料板作為冷凍固定板,在距離液氨面1-2cm處。待降溫恒定后,用滴管將經(jīng)平衡后的精液滴在冷凍板上。每顆精粒體積約為0.1ml,當(dāng)冷凍板上的顆粒由黃色轉(zhuǎn)為發(fā)白有光澤時(shí),可收集精粒。4、冷凍檢查:
取解凍液1ml,放入小試管內(nèi),浸入40℃熱水中經(jīng)2-3min后,投入顆粒凍精,待溶化1/2-2/3時(shí),取出精液試管,當(dāng)精液全部溶化后,檢查并評(píng)定精子活率。(四)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
冷凍精液解凍后觀察其品質(zhì),發(fā)現(xiàn)精子幾乎全部死亡。產(chǎn)生這樣的現(xiàn)象原因有可能是:1.可能是原精液的品質(zhì)低,精子的存活力低;2.葡萄糖消毒不準(zhǔn)確,導(dǎo)致一些精子被殺死;3.在平衡的時(shí)候?qū)拥陌粔颍?/p>
4.在冷凍的時(shí)候沒(méi)有在液氮面1-2cm處等待降溫,直接把冷凍板浸泡在液氮里;5.在解凍時(shí)沒(méi)有把解凍液加熱到指定溫度,就進(jìn)行了解凍。6.冷凍的操作不準(zhǔn)確,沒(méi)有做到位。六、PMSG和FSH生物測(cè)定法(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>
測(cè)定PMSG和FSH的活性,掌握該激素的簡(jiǎn)易效價(jià)測(cè)定方法,為將來(lái)進(jìn)行家畜繁殖方面的科研教學(xué)及畜牧生產(chǎn)實(shí)踐打下基礎(chǔ)。(二)實(shí)驗(yàn)材料
1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物:18-23日齡母兔3只。2、測(cè)定樣品:PMSG、FSH、生理鹽水。
3、測(cè)定器具:10ml注射器、4號(hào)針頭、酒精棉球、剪刀、鑷子、搪瓷盤(pán)、兔子固定架。(三)實(shí)驗(yàn)內(nèi)容
將兔子分3組,每組有1只兔子,將三只兔子作如下處理:
1、第一組兔子,第一天上下午分別注射FSH30單位。第二天上下午分別注射FSH30單位,第三天下午注射HCG60單位。
2、第二組兔子,第二天上午注射PMSG100單位,第三天下午注射HCG60單位。3、第三組的兔子,不做任何處理。
4、在第四天下午通過(guò)手術(shù)法,在兔子的最后一對(duì)乳頭中間做一個(gè)10cm左右的切口,然后用手將輸精管引出,從輸卵管傘插入一條導(dǎo)管,從宮管處注入沖卵液10-25ml,觀察排卵數(shù)。
(四)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
第一只兔子沖出10個(gè)卵泡,黃體數(shù)為12個(gè),第二只兔子未沖出卵泡,黃體不明顯,第三只兔子沖出1個(gè)卵泡,黃體數(shù)為1。第一只兔子注射了FSH(垂體促性腺激素),可促進(jìn)卵巢上的卵泡發(fā)育,分泌雌激素,在雌激素的作用下,又可促進(jìn)子宮、卵巢及整個(gè)生殖器官的發(fā)育、增大,增加排卵的個(gè)數(shù),第二只兔子注射PMCG,它與FSH有相同的作用,本應(yīng)增加排卵的個(gè)數(shù),可是并沒(méi)沖出卵泡,這是由于試驗(yàn)中選的兔子并沒(méi)有成熟,還沒(méi)開(kāi)始排卵導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗了,第三只兔子排卵數(shù)為4個(gè),黃體數(shù)為4,該兔子沒(méi)經(jīng)過(guò)處理,是在正常狀態(tài)下的排卵,起對(duì)照作用?偨Y(jié):
在這一周的實(shí)習(xí)中,掌握了影響精子活率的理化因素、采精的技術(shù)、對(duì)精子的品質(zhì)檢測(cè)、精液的冷凍及超數(shù)排卵和同期發(fā)情技術(shù)。雖然有的試驗(yàn)失敗,但是通過(guò)親手操作,掌握了相關(guān)技術(shù),并從失敗中得到經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn),為以后的發(fā)展奠定基礎(chǔ),下面是我的幾點(diǎn)總結(jié):
1、精子對(duì)理化因素要求較高,高溫、高滲透壓、低滲透壓、化學(xué)消毒藥物等,都能使精子的運(yùn)動(dòng)速度減慢,甚至全部殺死精子。因此,我們?cè)诒4婢簳r(shí)要注意理化因素對(duì)精子活率的影響,盡量使精子處于合適的理化條件下。
2、通過(guò)看錄像來(lái)學(xué)習(xí)理論知識(shí),形象生動(dòng),提高同學(xué)們的學(xué)習(xí)積極性,然后通過(guò)具體的實(shí)踐練習(xí)來(lái)發(fā)現(xiàn)自己知識(shí)掌握的不足,從而更全面、準(zhǔn)確的學(xué)習(xí)豬、牛、羊等家畜的生殖生理,及采精、人工受精技術(shù)。
3、給動(dòng)物采精時(shí),要注意氣候條件,如果天氣太熱,盡量安排在早上和傍晚,避免在炎熱的中午,溫度太高將會(huì)影響公畜的發(fā)情和射精,如果用母畜做臺(tái)畜,要用發(fā)情的母畜,這樣有利于采精的操作。
4、給公畜采精時(shí),要注意公畜的調(diào)教,同時(shí)要注意采精手法和環(huán)境。正確的采精方法是采精成功與否的關(guān)鍵。
5、精液的冷凍,要求相當(dāng)嚴(yán)格,要嚴(yán)格按照規(guī)格進(jìn)行。配制稀釋液和解凍液、稀釋與平衡、冷凍都要準(zhǔn)確無(wú)誤,是保證精子存活的基礎(chǔ)。同時(shí),原精液的活率也是實(shí)驗(yàn)成功與否的關(guān)鍵。
6、試驗(yàn)的選材是成功的關(guān)鍵,要準(zhǔn)確選擇符合要求的家畜。掌握超數(shù)排卵技術(shù),能為畜牧的發(fā)展做出貢獻(xiàn),同時(shí)節(jié)省資源。超數(shù)排卵技術(shù)是現(xiàn)在熱門的話題,也是一種新型的技術(shù)。參考文獻(xiàn):
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