植物生化實驗》綜合性實驗總結寫好的

福建農林大學生命科學學院綜合性實驗總結

《植物生理生化實驗》綜合性實驗總結

(201*－201*學年第一學期)

課程：《植物生理生化實驗》--生化實驗21學時成績：學院：林學院專業(yè)：林學年級：10級學號：102253007040姓名：陳薇

綜合性實驗項目面向專業(yè)吸脹與萌發(fā)水稻種子若干生化指標的差異分析10級農學、植保、農資、園藝、設施、茶學、本項目學時14學時林學、水保、制藥、生安等種子萌發(fā)是種子植物生長發(fā)育過程中的早期階段，是個體發(fā)育中最為關鍵的時期，直接影響到后期的出苗、生長和結實等。本綜合性實驗要求學生測定吸脹和萌發(fā)水稻種子的若干生化指標，利用植物生理生化理論知識綜合分析兩組種子之間可溶性蛋白質含量、游離氨基酸總量、過氧化物同工酶以及淀粉酶的活性等生化指標的差異。綜合性實驗報告總結吸脹與萌發(fā)水稻種子若干生化指標的差異分析摘要：以吸脹與萌發(fā)的水稻種子為材料，通過茚三酮試劑顯色法，F(xiàn)olin-酚試劑法，滴定法，活體法等方法測定了不同處理水稻種子的游離氨基酸含量、淀粉酶活性及其過氧化物同工酶特性。結果表明：與吸脹水稻種子相比，萌發(fā)水稻種子的游離氨基酸含量更高；可溶性蛋白質含量更高；淀粉酶活性更高；過氧化物同工酶含量更高；種子中各種酶活性提高，各種氨基酸含量升高，明顯有利于促進種子的萌發(fā)。引言植物根系吸收、同化的氮素主要以氨基酸和酰胺的形式進行運輸，所以測定植物組織中不同時期、不同部位游離氨基酸的含量，對于研究根系生理，氮素代謝等有一定意義；蛋白質作為細胞中含量最豐富的生物大分子，是生物體結構和功能最重要的基礎物質之一。蛋白質的含量測定，是植物生理、生化研究中最常用、最基本的分析方法之一；淀粉酶活性高低可以衡量種子萌發(fā)速率，也可以作為水稻抗旱性的生化指標；同工酶譜的差異是基因表達的差異造成的，所以在研究植物基因調控與生長發(fā)育及其與環(huán)境條件的關系以及許多生意生化和遺傳問題時，常常要分析同工酶譜的差異，因此，同工酶研究在理論和實踐中都有非常重要的意義。研究結果表明：與吸脹水稻種子相比，萌發(fā)水稻種子的游離氨基酸含量更高；可溶性蛋白質含量更高；淀粉酶活性更高；過氧化物同工酶含量更高；種子中各種酶活性提高，各種氨基酸含量升高，明顯有利于促進種子的萌發(fā)。1、材料與方法1.1試驗材料從大田或實驗地、試驗器皿中采取原始樣品，再按原始樣品的種類分別選出平均樣品。本實驗的使用到的試驗材料為吸脹水稻種子、萌發(fā)水稻種子、水果或蔬菜、甘薯葉柄和葉片。

實驗內容介紹福建農林大學生命科學學院綜合性實驗總結

1.2試驗方法1.2.1游離氨基酸含量測定：采用茚三酮試劑顯色法1.2.2可溶性蛋白質含量測定：采用Folin-酚試劑法1.2.3淀粉酶活性測定：采用3,5-二硝基水楊酸顯色法1.2.4過氧化物同工酶測定：采用垂直平板凝膠電泳法2、結果與分析2.1吸脹與萌發(fā)水稻種子游離氨基酸含量比較處理游離氨基酸含量（單位）吸脹8060（ug/100g）萌發(fā)14270（ug/100g）氨基酸的游離氨基與水合茚三酮作用后，能產生二酮茚胺的取代鹽等藍紫色化合物。在一定范圍內，其顏色的深淺與氨基酸的含量成正比。氨基酸脫氨脫羧被氧化，水合茚三酮被還原。結果表明：與吸脹水稻種子相比，萌發(fā)水稻種子的游離氨基酸含量更高。2.2吸脹與萌發(fā)水稻種子可溶性蛋白含量比較處理游離氨基酸含量（單位）吸脹34（ug/g）萌發(fā)47.6（ug/g）在堿性條件下，蛋白質中的肽鍵與銅結合生成紫紅色的蛋白質即銅絡合物；此絡合物以及蛋白質中絡氨酸和苯丙氨酸等芳香族氨基酸的殘基使磷鉬酸-磷鎢酸試劑還原，產生深色混合物。在一定條件下，顏色深淺與蛋白質含量成正相關。結果表明：與吸脹水稻種子相比，萌發(fā)水稻種子的可溶性蛋白質含量更高。2.3吸脹與萌發(fā)水稻種子淀粉酶活性比較處理總酶活（單位）α淀粉酶活性（單位）β淀粉酶活性（單位）吸脹2.100（mg/gmin）1.012（mg/gmin）0.088（mg/gmin）0.264（mg/gmin）萌發(fā)2.948（mg/gmin）2.684（mg/gmin）淀粉酶產生的還原糖能使3,5-二硝基水楊酸還原，生成棕紅色的3-氨基-5-硝基水楊酸，淀粉酶活力的大小與產生的還原糖的量成正比，可以用麥芽糖制作標準曲線，用比色法測定淀粉生成的還原糖的量，以單位重置樣品在一定時間內生成的還原糖的量表示酶活力。幾乎所有植物中都存在有淀粉酶，特別市萌發(fā)后的禾谷類種子淀粉酶活性最強。主要是α-淀粉酶和β-淀粉酶。α-淀粉酶不耐酸，在PH3.6以下迅速鈍化；而β-淀粉酶不耐熱，在70攝氏度15分鐘則被鈍化，根據(jù)它們的這種特性，在測定時鈍化其中之一，就可測出另一個的活力。本實驗采用加熱鈍化β-淀粉酶測出α-淀粉酶的活力，在與非鈍化條件下測定的總活力（α+β）比較，求出β-淀粉酶的活力。

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2.4吸脹與萌發(fā)水稻種子過氧化物同工酶比較處理條帶比移值Rf=a/b吸脹80.03、0.054、0.11、0.16、0.46、0.64、0.84、0.88萌發(fā)70.02、0.06、0.125、0.4、0.52、0.88、0.94被分離物質猶豫所載電荷數(shù)量、分子大小和形狀的差異，因此在電泳是產生不同的泳動速率而相互分離。利用過氧化物酶能催化雙氧水吧聯(lián)苯胺氧化成藍色或棕褐色產物的原理，將經過電泳后的凝膠至于有雙氧水及聯(lián)苯胺的溶液染色，出現(xiàn)藍色或棕褐色部位即為過氧化物酶同工酶在凝膠中存在的位置，多條有色帶即構成過氧化物酶同工酶譜。3、結論與討論3.1實驗結果表明：與吸脹水稻種子相比，萌發(fā)水稻種子的游離氨基酸含量更高；可溶性蛋白質含量更高；淀粉酶活性更高；過氧化物同工酶含量更高；種子中各種酶活性提高，各種氨基酸含量升高，明顯有利于促進種子的萌發(fā)。3.2.通過實驗：了解了氨基酸總量測定的意義及其在本專業(yè)中的應用，掌握了茚三酮十幾顯色法測定氨基酸總量的原理和方法，學會分光光度計的使用方法和標準曲線的繪制方法；了解測定植物體內可溶性蛋白質的意義和用途，及可溶性蛋白質測定的集中方法，掌握了Folin-酚試劑法測定蛋白質含量的原理及要點；了解α-淀粉酶和β-淀粉酶的不同點及其淀粉酶活性測定的意義，掌握了很溫水浴的控溫方法，學會用3,5-二硝基水楊酸顯色法測定淀粉酶活性的原理及其操作要點，及不同處理的萌發(fā)種子淀粉酶活性的差異；了解了同工酶研究在理論和實踐中的重要意義，了解了聚丙烯酰胺凝膠中各種化學試劑的作用，通過本實驗掌握了電泳技術的原理、方法、凝膠配制、染色方法等等，熟悉垂直平板凝膠電泳裝置、操作方法。比較不同處理的萌發(fā)種子過氧化物酶譜的差異。參考文獻王學奎，植物生理生化實驗原理和技術（第2版），北京：高等教育出版社，201*柯玉琴，植物生理生化實驗，，201*/12/3指導教師評語：指導教師簽名：年月日

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綜合性實驗項目面向專業(yè)吸脹與萌發(fā)水稻種子若干生化指標的差異分析10級農學、植保、農資、園藝、設施、茶學、林學、水保、制藥、生安等本項目學時14學時種子萌發(fā)是種子植物生長發(fā)育過程中的早期階段，是個體發(fā)育中最為關鍵的時期，實驗內容介紹直接影響到后期的出苗、生長和結實等。本綜合性實驗要求學生測定吸脹和萌發(fā)水稻種子的若干生化指標，利用植物生理生化理論知識綜合分析兩組種子之間可溶性蛋白質含量、游離氨基酸總量、過氧化物同工酶以及淀粉酶的活性等生化指標的差異。綜合性實驗報告總結福建農林大學生命科學學院綜合性實驗總結

指導教師評語：指導教師簽名：年月日

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