微生物實驗總結(jié)

食品衛(wèi)生綜合檢驗試驗總結(jié)

食品質(zhì)量091金秀建201*016521

為期五天（201*年6月11日-15日）的食品衛(wèi)生綜合檢測實驗已經(jīng)告一段落了，在這一周的微生物實驗主要包括牛奶中大腸菌群的計數(shù)、雞蛋中沙門氏菌的檢驗和牛奶中金黃色葡萄球菌的檢驗三個實驗，經(jīng)過三個綜合實驗的課程，能讓我更能理解試驗時要掌握的細節(jié)，也要保持頭腦的時刻清醒。同時讓我對這三種微生物有了更進一步的認識，同時讓我也對實驗也更加熟悉了。

首先我們做的是大腸菌群的計數(shù)，它是采用MPN（最大可能數(shù)法）的計數(shù)來測定的。大腸菌群的特性為：在37℃，24小時內(nèi)能發(fā)酵乳糖，產(chǎn)酸、產(chǎn)氣，好氧或兼性厭氧的革蘭氏陰性無芽孢桿菌，一般認為該菌群細菌可包括大腸埃希氏菌、檸檬酸桿菌、產(chǎn)氣克雷白氏菌和陰溝腸桿菌等。其檢測原理為細菌在樣品內(nèi)的分布是隨機的，所以檢測細菌時，可按概率理論計算菌數(shù)。大腸菌群MPN計數(shù)的檢驗程序為樣品的稀釋、初發(fā)酵試驗、復發(fā)酵試驗和最后的大腸菌群最可能數(shù)(MPN)的報告。那么在第一天的上午，老師基本給我們講了實驗的原理和步驟，以及一些需要注意的地方，我們便開始計算自己需要配制的實驗試劑的量，并且稱取試劑的量和清洗所要用的實驗器皿，首先配置的是生理鹽水和LST肉湯，并且把生理鹽水和LST肉湯分裝到試管內(nèi)，蓋好蓋子包扎好進行滅菌，滅完菌也就到了吃飯時間，等下午來接種培養(yǎng)了。

牛奶樣品與生理鹽水以1:9的比例進行混合，搖勻后做10倍系列的稀釋，做了3個稀釋度。隨后將三個稀釋度的樣品勻液以每個稀釋度3支試管接種到內(nèi)裝小導管的含LST肉湯的試管中，最后放入恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。在經(jīng)過24h的培養(yǎng)后，所有的試管內(nèi)均產(chǎn)生氣體，而后我們要將培養(yǎng)后的有菌落的LST肉湯接種到BGLB肉湯試管中進行培養(yǎng)24-48h，觀察后發(fā)現(xiàn)所有的BGLB管都產(chǎn)氣，顏色也有原來的綠色變成暗黃色，證明也產(chǎn)生了酸，所以記為所有產(chǎn)氣管為大腸菌群陽性管。最后查MPN表可得出每毫升樣品中大腸菌群的MPN為大于等于1100ml/MPN。

我們小組在做大腸菌群測定還是很順利的，中途沒有出現(xiàn)什么錯誤，實驗很順利，小組成員的配合和分工也都很好。

第二個實驗是雞蛋中的沙門氏菌的檢測，他的特性是：沙門氏菌需氧或兼性厭氧，10-42℃都可生長，最適溫度為37℃，大部分可發(fā)酵葡萄糖，產(chǎn)酸產(chǎn)氣，是革蘭氏陰性的無芽孢桿菌。在營養(yǎng)瓊脂平板上生長產(chǎn)生光滑，濕潤，半透明，邊緣整齊的菌落。在血平板上產(chǎn)生透明溶血環(huán)，形成大小中等的灰白色菌落。實驗過程可分為前增菌、選擇性增菌、選擇性平板分離、生物化學篩選四個階段。

實驗首先配制BPW溶液，進行分裝和高壓滅菌，在無菌條件下，移取5ml雞蛋液樣品于盛有45mlBPW的組織培養(yǎng)瓶中，混勻，放置于36℃±1℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h±2h，觀察生長現(xiàn)象。接下來的增菌階段，需要配制TTB增菌液和SC增菌液，移取1ml的前增菌液接種到10mlTTB增菌液內(nèi)，在恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)18h～24h，SC增菌液過程與TTB一樣。接下來需要制備BS平板和HE平板，等平板凝固后便可以開始接種了，是采用平板分多區(qū)劃線的方法，然后放在37度溫箱培養(yǎng)18~24h。最后要進行生化實驗，要先配制三糖鐵瓊脂，從培養(yǎng)皿的平板上挑取可疑菌落，接種到三糖鐵瓊脂，先與底層穿刺，再在斜面劃線。同時把菌落接種到各種生化試劑里，封口后一起放入恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)18h。取出培養(yǎng)皿和生化小試管觀察結(jié)果，記錄。

第三個實驗是金黃色葡萄球菌的檢驗，它的特性一般是無芽孢，鞭毛。大多數(shù)無莢膜，革蘭氏染色陽性，它培養(yǎng)的營養(yǎng)要求不高，在普通培養(yǎng)基上就能生長良好，需氧或兼性厭氧。在血平板上培養(yǎng)會使紅細胞破裂，形成透明的溶血環(huán)。在顯微鏡下可以看到是紫色的，排列成葡萄狀的圓形的菌。

首先是樣品的處理，稱取22g7.5%氯化鈉肉湯溶解于250ml水中，在每個均質(zhì)瓶內(nèi)移取45ml，同時制取Baird-Parker培養(yǎng)基，高壓滅菌后吸取牛奶樣品5ml到均質(zhì)瓶內(nèi)。放入恒溫箱培養(yǎng)18-24h。然后用接種環(huán)取培養(yǎng)物分別劃線接種到Baird-Parker平板和血平板上，培養(yǎng)18-24h，Baird-Parker平板有可能需要培養(yǎng)45-48h。最后進行血漿凝固酶試驗，挑取BP平板或血平板上可疑菌落1個或以上，分別接種到5ml左右BHI肉湯中，36±1℃培養(yǎng)18-24h。取新鮮兔血漿0.5ml，加入BHI培養(yǎng)物0.2-0.3ml，振蕩搖勻，置36±1℃溫箱培養(yǎng)，半小時觀察一次，6小時觀察，直至出現(xiàn)凝固，判為陽性結(jié)果。也有小組6h后也沒凝固的，則判為陰性。最后進行革蘭氏染色實驗，觀察細菌的形態(tài)特征。最后記錄結(jié)果。

三個實驗雖然不多，但是三個實驗的跨度剛好是一個星期，所以我們實驗剛好可以做完，實驗從剛開始的懵懂到慢慢的熟悉，到最后的成功，少不了的是小組合作和老師的幫助。經(jīng)過三個微生物的實驗，讓我對微生物實驗的過程。不過對于微生物的實驗一定要細心，一個是它需要的時間很長，要滅菌和培養(yǎng)，如果做錯都得重新再來，并且實驗過程中不能被污染，否則會對實驗結(jié)果造成一定的污染或完全不可用。對實驗流程一定要熟悉，現(xiàn)象一定要觀察仔細，因為類似的菌類有很多，其生產(chǎn)的習性也類似，若不觀察仔細，就會有結(jié)果的偏差。我們小組的實驗都很順利，中途雖有一點點過失，但對實驗的進度和結(jié)果沒有什么大的影響，實驗結(jié)果也是讓我們蠻有成就感的，感謝小組的配合。操作不像理論，只有多次練習才有體會，在今后的實驗中，我會更加努力。

擴展閱讀：微生物實驗心得體會

微生物實驗心得

姓名：關(guān)琦琦學號：09070401048班級：生物科學09-2班指導老師：吾爾恩微生物實驗心得

本學期已臨近尾聲，我們即將告別微生物實驗這門課程，在這一學期，八個微生物實驗中，我們學到了許多知識，這些知識將會陪伴我們一生，下面我們就來通過一些實驗來回顧一下本學期的微生物實驗。

我選取的實驗是《環(huán)境因素對微生物的影響》，之所以選擇這則實驗是因為這則實驗比較簡單，而且涉及面非常多。首先我們來分析一下這則實驗所涉及到的知識面。環(huán)境對微生物生長影響主要分以下幾種

溫度：通過影響蛋白質(zhì)、核酸等生物大分子的結(jié)構(gòu)與功能以及細胞結(jié)構(gòu)入細胞膜的流動性及完整性來影響微生物的生長、繁殖和新陳代謝。微生物群體生長、繁殖最快的溫度為其最適生長溫度。

PH:H+影響菌體細胞質(zhì)膜上電荷性質(zhì)，微生物吸收物質(zhì)變化，影響代謝，高濃度H+或引起菌體表而蛋白質(zhì)和核酸水解以及影響酶和活性.

滲透壓：微生物在等滲溶液中可正常生長繁殖；在高滲溶液中細胞失水，生長受到抑制；在低滲溶液中，細胞吸水膨脹，因為大多數(shù)微生物具有較為堅韌的細胞壁，細胞一般不會裂解，可以正常生長，但低滲溶液中溶質(zhì)含量低，在某些情況下也會影響微生物的生長。

抗生素：在自然界中普遍存在微生物間的拮抗作用，許多微生物可以產(chǎn)生抗生素，能選擇性的抑制或殺死其他微生物。

微生物的實驗其實簡單來說步驟幾乎相同：制作培養(yǎng)基、倒平板、接種微生物、培養(yǎng)、觀察菌種生長情況從而得出結(jié)論。本次實驗也是這樣首先制作培養(yǎng)基，在進行倒平板步驟時，對平板環(huán)境進行區(qū)分，然后進行接種。

在進行倒平板的時候，要注意在無菌條件下進行倒置，同時也要保持平板的厚度均勻。

在進行菌種接種的時候，選擇合適的劃線方式，一般是選擇Z字形劃線法，注意不要把平板弄破，等到平板凝固后才可以進行接種。接種時也要注意在無菌條件下接種。經(jīng)過培養(yǎng)后，再觀察最后得出結(jié)論。

通過一學期的實驗，我越發(fā)的明白實驗操作對于結(jié)果的重要性。實的基礎(chǔ)。實驗操作可以說是實驗成功與否的關(guān)鍵部分，可是馬虎不得。對于需要團隊合作的實驗，個人認為要有強勢的人員搭檔，不說是精通實驗操作規(guī)程，最少也得知道實驗的基本操作，掌握要做實驗的操作方法，這對于后續(xù)的實驗無疑是與決定性作用的。對于個人的實驗能力，關(guān)鍵還是要看平時的積累，有些實驗操作繁瑣復雜，需要極大的耐心，這些都應該是逐漸培養(yǎng)起來的。最后，簡單談一下自己在微生物實驗室做實驗的心得體會。剛開始的時候，最令我頭痛的就是培養(yǎng)基的配制、消毒滅菌，培養(yǎng)基的配制和消毒與滅菌兩個實驗可以說是微生物實驗的最近本課程，內(nèi)容有配制培養(yǎng)基、分裝培養(yǎng)基、為下次試驗準備菌種及無菌器材等，內(nèi)容顯得非常繁多緊湊，需要準備的器材、藥品及用具較多、較雜、較細。最后只能是提前參照微生物實驗教材，將實驗過程中所涉及到的藥品、器材及儀器等統(tǒng)統(tǒng)羅列出來，計算出實驗時大小材料需用的數(shù)量，這樣，一方面可以有效避免在實驗準備時遺忘相關(guān)物品，另一方面也可為以后同一實驗的準備工作提供依據(jù)，使實驗準備工作逐步趨于程序化，從而在有效低實驗準備工作量的同時，最大限度地提高準備效率。還有一點很重要，在科研型實驗室里就不能不說導師和師兄師姐，其實他們才是最具價值的“活文獻”，他們就是實驗室里的參考文獻，活參考書。生物就是一門實驗的科學，其中科研經(jīng)驗的積累就是一個非常重要的組成部分，導師和師兄師姐的一句話往往可以事半功倍，大幅提高實驗的成功率和效率�？傊�，為了保證實驗過程高質(zhì)高量完成，除了實驗準備及實驗過程外，還要求實驗技術(shù)人員必須具備相應的素質(zhì)，實驗操作人員必須具備較扎實的專業(yè)基礎(chǔ)、熟練的實驗技能及高度的責任心，在工作中要善于總結(jié)，同時還要和理論課老師積極溝通，這樣才能夠真正的學好微生物實驗這門課程。

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