ABO血型鑒定總結(jié)-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試

ABO血型鑒定總結(jié)-臨床醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)考試

1.AB0血型鑒定原理

常用鹽水凝集法檢測(cè)紅細(xì)胞上存在的血型抗原，以及血清中存在的血型抗體，依據(jù)抗原抗體存在的情況判定血型。常規(guī)的方法有：①正向定型：用已知抗體的標(biāo)準(zhǔn)血清檢查紅細(xì)胞上未知的抗原。②反向定型：用已知血型的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞檢查血清中未知的抗體。結(jié)果判定：凡紅細(xì)胞出現(xiàn)凝集者為陽(yáng)性，呈散在游離狀態(tài)為陰性。

2.鑒定方法

（1）生理鹽水凝集法：①玻片法：操作簡(jiǎn)單，適于大量標(biāo)本檢查，但反應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)；被檢查者如血清抗體效價(jià)低，則不易引起紅細(xì)胞凝集，因此，不適于反向定型。②試管法：由于離心作用可加速凝集反應(yīng)，故反應(yīng)時(shí)間短，而且，借助于離心力可以使紅細(xì)胞接觸緊密，促進(jìn)凝集作用，適于急診檢查。

紅細(xì)胞亞型抗原性弱，如抗A抗B標(biāo)準(zhǔn)血清效價(jià)低時(shí)，易造成漏檢或誤定。如加用O型（抗A、B）血清和反向定型，可避免此類(lèi)錯(cuò)誤醫(yī)學(xué)`教育網(wǎng)搜集整理。

玻片法凝集結(jié)果判斷：紅細(xì)胞呈均勻分布，無(wú)凝集顆粒，鏡下紅細(xì)胞分散。在低倍鏡下凝集程度強(qiáng)弱判斷標(biāo)準(zhǔn)：①呈一片或幾片凝塊，僅有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（++++）。②呈數(shù)個(gè)大顆粒狀凝塊，有少數(shù)單個(gè)游離紅細(xì)胞為（+++）。③數(shù)個(gè)小凝集顆粒和一部分微細(xì)凝集顆粒，游離紅細(xì)胞約占1/2為（++）。④肉眼可見(jiàn)無(wú)數(shù)細(xì)沙狀小凝集顆粒。于鏡下觀察，每凝集團(tuán)中有5～8個(gè)以上紅細(xì)胞凝集為（+）。⑤可見(jiàn)數(shù)個(gè)紅細(xì)胞凝集在一起，周?chē)�有很多的游離紅細(xì)胞（±）。⑥可見(jiàn)極少數(shù)紅細(xì)胞凝集，而大多數(shù)紅細(xì)胞仍呈分散分布為混合凝集外觀。⑦鏡下未見(jiàn)細(xì)胞凝集，紅細(xì)胞均勻分布為（-）。

（2）凝膠微柱法：是紅細(xì)胞抗原與相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中發(fā)生凝集反應(yīng)的免疫學(xué)方法。血型抗體為單克隆抗體，加入試劑、標(biāo)本，用專(zhuān)用離心機(jī)離心后可直接用肉眼觀察結(jié)果或用血型儀分析。此法操作標(biāo)準(zhǔn)化，定量加樣，確保結(jié)果準(zhǔn)確性。

3.抗A、抗B和抗AB標(biāo)準(zhǔn)血清標(biāo)準(zhǔn)

準(zhǔn)血清均采自健康人，并應(yīng)符合下述條件：醫(yī)學(xué)教`育網(wǎng)搜集整理①特異性：只能與相應(yīng)的紅細(xì)胞抗原發(fā)生凝集，無(wú)非特異性凝集。②效價(jià)：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)抗A和抗B血清效價(jià)均在1：128以上。③親和力：我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)要求抗A對(duì)A1、A2及A2B發(fā)生反應(yīng)開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間分別是15s、30s和45s；抗B對(duì)B型紅細(xì)胞開(kāi)始出現(xiàn)凝集的時(shí)間為15s.凝集強(qiáng)度為3min時(shí)，凝塊不小于1mm2.④冷凝集素效價(jià)：在1：4以下。⑤無(wú)菌。⑥滅活補(bǔ)體。

4.血型鑒定操作時(shí)注意事項(xiàng)

一般注意事項(xiàng)：①所用器材必須干燥清潔、防止溶血，凝集和溶血的意義一樣。為避免交叉污染，建議使用一次性器材。標(biāo)準(zhǔn)血清從冰箱取出后，應(yīng)待其平衡至室溫后再用，用畢后應(yīng)盡快放回冰箱保存。②加試劑順序：一般先加血清，然后再加紅細(xì)胞懸液，以便核實(shí)是否漏加血清。③雖然IgM抗A和抗B與相應(yīng)紅細(xì)胞的反應(yīng)溫度以4℃最強(qiáng)，收集整理但為了防止冷凝集現(xiàn)象干擾，一般在室溫20℃～24℃內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)，而37℃條件，可使反應(yīng)減弱。④幼兒紅細(xì)胞抗原未發(fā)育完全、老年體弱者抗原性較弱，最好采用試管法鑒定血型。⑤玻片法反應(yīng)時(shí)間不能少于10min，否則較弱凝集不能出現(xiàn)，造成假陰性。⑥正、反定型結(jié)果一致才可發(fā)報(bào)告。⑦反定型法：先天性免疫球蛋白缺陷，長(zhǎng)期大量應(yīng)用免疫抑制，血型抗體可減弱或消失；血清中存在自身免疫性抗體、冷凝集素效價(jià)增高、多發(fā)性骨髓瘤、免疫球蛋白異常均可造成反定型困難；新生兒體內(nèi)可存在母親輸送的血型抗體，且自身血型抗體效價(jià)又低，因而出生6個(gè)月以?xún)?nèi)的嬰兒不宜做反定型。老年人血清中抗體水平大幅度下降或被檢者血清中缺乏抗A及（或）抗B抗體，可引起假陰性或血型鑒定錯(cuò)誤。

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臨床檢驗(yàn)ABO血型鑒定的質(zhì)量控制

【中圖分類(lèi)號(hào)】r457【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】a【文章編號(hào)】1672-3783（201*）10-0334-02

【摘要】目的探討運(yùn)用簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)的方法獲得較準(zhǔn)確的血型鑒定結(jié)果。方法由初檢人員用玻片凝集法做血型正定型，結(jié)果為擬報(bào)血型，由審核人員用試管凝集法做反定型，其結(jié)果和擬報(bào)血型核對(duì)，結(jié)果相符后簽發(fā)報(bào)告。結(jié)果采用此法后，無(wú)1例血型錯(cuò)誤投訴，交叉配血時(shí)未發(fā)現(xiàn)因血型錯(cuò)誤而引起的交叉配血不合。結(jié)論該方法簡(jiǎn)便、經(jīng)濟(jì)，有很好的質(zhì)量控制效果。

【關(guān)鍵詞】血型；玻片凝集法；試管凝集法；質(zhì)量控制血型鑒定是每個(gè)入院患者都需要做的常規(guī)檢驗(yàn)項(xiàng)目之一，特別是需要輸血的患者輸血前必須鑒定血型，輸血前準(zhǔn)確的血型鑒定工作是安全輸血的重要保證。目前臨床實(shí)驗(yàn)室最常用的abo血型的鑒定方法是血凝實(shí)驗(yàn)和微柱凝膠試驗(yàn)（mgt），血凝試驗(yàn)是指抗體和紅細(xì)胞在液體介質(zhì)中發(fā)生肉眼可見(jiàn)的凝集反應(yīng)，根據(jù)操作方法的不同，主要分為3種方法即玻片法、試管法和全自動(dòng)微板法。傳統(tǒng)的血型鑒定方法如玻片凝集法因操作簡(jiǎn)便、節(jié)省材料、價(jià)廉等優(yōu)點(diǎn)，目前仍然廣泛應(yīng)用于臨床，但在臨床實(shí)際工作中卻容易出現(xiàn)差錯(cuò)。試管離心法雖然結(jié)果較準(zhǔn)確，但操作較繁瑣費(fèi)時(shí)。全自動(dòng)微板法具有快速、準(zhǔn)確、自動(dòng)化程度高等優(yōu)點(diǎn)，但需要特殊設(shè)備。而微柱凝膠法雖然方法學(xué)先進(jìn)，操作簡(jiǎn)單，所需樣本量少，程序自動(dòng)化，結(jié)果明確可靠，但成本價(jià)高，價(jià)格昂貴，患者難以接受。為患者提供安全

廉價(jià)精細(xì)的服務(wù)是醫(yī)務(wù)工作者的服務(wù)宗旨。為了得出價(jià)廉、準(zhǔn)確的血型鑒定結(jié)果，筆者采用了一種簡(jiǎn)便經(jīng)濟(jì)的方法，取得了很好的質(zhì)控效果。1材料與方法：

1.1標(biāo)本來(lái)源201*年1月至201*年12月本院患者檢查血型樣本360例及血站提供給本院血庫(kù)的120袋獻(xiàn)血者懸浮紅細(xì)胞的樣本。

1.2血型試劑標(biāo)準(zhǔn)抗a、抗b血清（單克隆抗體）由長(zhǎng)春博德生物技術(shù)有限公司提供，效價(jià)為128，特異性及親和力均符合國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)，保存在2￣8℃冰箱，有效期內(nèi)使用。生理鹽水及37℃水浴箱。

1.3abo標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞（本實(shí)驗(yàn)室自制）取3名同型獻(xiàn)血者的紅細(xì)胞，混勻，用生理鹽水洗滌3次，配制成2%5%的標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞懸液，每天配制1次。1.4方法

1.4.1患者血型鑒定由初檢人員用玻片凝集法對(duì)abo血型進(jìn)行正定型，其結(jié)果為擬報(bào)血型，由審核人員用試管凝集法進(jìn)行反定型，其結(jié)果和擬報(bào)血型進(jìn)行核對(duì)，核對(duì)結(jié)果相符后簽發(fā)報(bào)告。如遇正、反定型結(jié)果不一致，則通過(guò)一系列試驗(yàn)作進(jìn)一步鑒定，明確血型鑒定結(jié)果后發(fā)出報(bào)告。

1.4.2復(fù)核獻(xiàn)血者樣本血型交叉配血時(shí)，由操作人員用正反定型復(fù)查獻(xiàn)血者血型，結(jié)果與血站提供的血型核對(duì)，如發(fā)現(xiàn)血型不符

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